LC液相色譜儀由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測量之后，導入進(jìn)樣器。被測物由進(jìn)樣器注入，并隨流動(dòng)相通過(guò)色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測器，檢測信號由數據處理設備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復雜的混合物分離(極性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類(lèi)似，不同的是氣相色譜改變溫度，而LC液相色譜儀改變的是流動(dòng)相極性，使樣品各組分在*條件下得以分離。
LC液相色譜儀使用中常見(jiàn)的問(wèn)題及注意事項
1、過(guò)濾時(shí)有時(shí)會(huì )出現流動(dòng)相漏液?？赡艿脑蚴菫V膜放置不正確和接頭有點(diǎn)錯位，導致流動(dòng)相從縫隙中漏出。
注意：操作時(shí)，應先向濾瓶?jì)鹊谷肷倭苛鲃?dòng)相，觀(guān)察是否漏液并開(kāi)始過(guò)濾，若未漏液，再向濾瓶中添加流動(dòng)相。
2、超聲時(shí)，瓶外液體的液面應高于瓶?jì)攘鲃?dòng)相的液面，否則流動(dòng)相內的氣體可能無(wú)法排出液體，氣體仍然殘留在流動(dòng)相內，以致開(kāi)機排氣時(shí)無(wú)氣泡排出。
3、開(kāi)機排氣結束后，應先將流動(dòng)相流量調小，再關(guān)閉排氣閥，否則會(huì )導致柱壓瞬間升高超過(guò)壓力上限，致使泵停止工作。
4、反相LC液相色譜儀沖洗柱子時(shí)，應盡量避免使用純水流動(dòng)相沖洗柱子，因為水極性強，會(huì )損害色譜柱，導致柱效下降。
5、沖洗色譜柱時(shí)，還可輔助以不同比例的混合流動(dòng)相沖洗色譜柱，以沖出不同極性的殘留物質(zhì)，但zui后還是要用純有機流動(dòng)相沖洗色譜柱一段時(shí)間。
6、在實(shí)驗過(guò)程中會(huì )出現壓力超過(guò)上限或壓力偏高，有可能是柱內有殘留物質(zhì)未被沖出，此時(shí)應用較大流速的有機流動(dòng)相充分沖洗色譜柱。若條件允許，也可采用梯度洗脫的方式?jīng)_洗色譜柱。壓力過(guò)高也有可能是濾頭堵塞，此時(shí)可將濾頭取出放到有機溶劑中超聲。
7、若隔天或更長(cháng)時(shí)間不使用LC液相色譜儀，應將兩流動(dòng)相瓶中均倒入純的有機流動(dòng)相（因為水流動(dòng)相長(cháng)時(shí)間不用會(huì )滋生細菌，污染濾頭和色譜柱，導致下次開(kāi)機使用時(shí)會(huì )出現鬼峰，基線(xiàn)不穩）。
8、進(jìn)樣時(shí)所進(jìn)樣品的體積應不小于色譜柱的zui大容積，且進(jìn)樣時(shí)注射器里的氣泡一定要排出，不可將氣泡打進(jìn)色譜柱。
