LC液相色譜儀是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上,于20世紀60年代后期引入了LC液相色譜儀理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻。因為較小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì )引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜。
使用LC液相色譜儀時(shí),液體待檢測物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測器得到不同的峰信號,zui后通過(guò)分析比對這些信號來(lái)判斷待測物所含有的物質(zhì)。LC液相色譜儀作為一種重要的分析方法,廣泛地應用于化學(xué)和生化分析中。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。
LC液相色譜儀的構造
液相色譜系統主要由流動(dòng)相儲液瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成,其整體組成類(lèi)似于氣相色譜,但是針對其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調整。液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩,進(jìn)樣系統要求進(jìn)樣便利、切換嚴密。同時(shí),由于液體流動(dòng)相黏度遠遠高于氣體,為了減低柱壓,液相色譜的色譜柱一般比較粗,長(cháng)度也遠小于氣相色譜柱。
液相色譜應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。
(1)分離混合物
LC液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類(lèi)繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
通過(guò)與試樣預處理技術(shù)相配合,液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著(zhù)固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。
(2)生化分析
由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應用到生物化學(xué)、食品分析、醫藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問(wèn)題zui有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用
LC液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類(lèi)等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。